导语本文整理了细胞融合的基本原理和方法知识,不管是了解相关知识,还是写作素材整理,都是理想的参考文章,希望对您有所帮助!
1、病毒诱导助融:
细胞融合在自然界是存在的,细胞融合研究首先也是基于自发的细胞融合,1957年,冈田善雄意外发现仙台病毒,能诱导悬液中艾氏腹细胞融合,然后harris、kada等用于诱导种间细胞融合,获得成功。
2、化学助融:
1972年,卡尔森首先用硝酸钠进行烟草两个种的细胞原生质体的融合,1974年kao等首先发现聚乙二醇能诱导植物细胞原生质体融合产生杂交细胞。1975年pentecorvo,发现聚乙二醇亦能帮助哺乳类动物细胞的融合,1976年davidson更进一步证实这一结果,并且认为其具有简单快速、高效率等优点。因而,1975年之后聚乙二醇就逐渐取代了仙台病毒.
3:电融合法:
电融合法是70年代未期和80年代初期发展起来的一种新的细胞融合方法。senda在1970年首先应用电脉冲,通过微电极在显微镜下使植物细胞融合,奠定电融合技术基础。
4、激光诱导卵细胞融合:
激光诱导卵细胞融合是最新的细胞融合方法,该法为张闻迪等人首先应用,他们利用激光微束的单色性、高功率密度、短脉宽和极小的作用范围等特点。对泥鳅受精卵进行融合试验,获得成功,且融合后的细胞可存活发育,经卵裂期、囊胚期、原肠期、孵化期、直至幼鱼。整个过程可通过显微镜观察,还可同时由电视摄象监视器观察和进行照相记录。.
延伸阅读
判断细胞死活的方法
死活细胞的鉴定方法有很多种,常用的有染色法和仪器分析法。
染色法分化学染色法和荧光染色法,根据染色机理的不同,染料或使死细胞着色,或使活细胞着色,以此来区分死活细胞。
仪器分析法可采用微电极技术、全自动分析细胞记数仪和流式细胞仪等,可对细胞的死活进行精确的批量检测。
固定化细胞的方法
细胞的种类多种多样,大小和特性个不相同,故此细胞固定化的方法有很多种。归结起来,主要可以分为吸附法和包埋法两大类,两种细胞固定化方法的适用范围也不同,两种细胞固定化方法的适用范围也不同。
第一类吸附法:利用各种吸附剂,将细胞吸附在其表面而使细胞固定的方法称为吸附法。
用于细胞固定化的吸附剂主要有硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃、多孔塑料、金属丝网、微载体、和中空纤维等。
第二类包埋法:将细胞包埋在多空载体内部而制成固定化细胞的方法称为包埋法。包埋法可分为凝胶包埋法和半透膜包埋法。
凝胶包埋法是应用最广泛的细胞固定方法。
细胞培养的基本方法有哪些
细胞培养的基本方法有贴壁培养、悬浮培养和固定化培养。贴壁培养主要适用于贴壁依赖性细胞。此类需要相互依赖,需贴附于不起化学作用的物质(玻璃或塑料等无活性物质)的表面生长、生存和维持,并最终在附着面生长至单层,铺满平面时便会发生接触抑制。来源于血液、淋巴组织的细胞,及许多肿瘤细胞(包括杂交瘤细胞)和某些转化细胞等属于悬浮培养型细胞,细胞为非贴壁依赖性细胞,无需支撑面,细胞或细胞聚集体悬浮于液体培养基中增殖。悬浮培养是大规模细胞培养的理想方式,可采用类似于微生物的方法进行悬浮培养。动物细胞较微生物脆弱,易受剪切力等的影响,而细胞固定化技术可较好的保护细胞免受机械力及环境变化的影响,提高细胞的耐受力,促使细胞高密度培养,提高目的产物的产率。